湖南韻邦生物醫藥有限公司
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談談CAPS在蛋白質轉膜實驗中的應用



CAPS是,全稱3-(環己胺)-1-丙磺酸,一種有機化學物質,白色結晶粉末,CAS號1135-40-6,是一種生物緩沖劑,常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒。用于酶化學及HPLC分離堿性藥物的緩沖液,在蛋白測序的轉膜過程中應用廣泛。CAPS緩沖液由CAPS、去離子水組成,調PH到11.0,用于纖連蛋白的純化。


操作要點

1、SDS-PAGE電泳按常規條件進行(CAPS系統用于>=20KD蛋白Tris-Tricine系統用于低分子量蛋白,也可用于高分子量蛋白)

2、甲醇濃度CAPS電印跡緩沖液中甲醇濃度范圍是0-20%(甲醇濃度高,用于低分子量蛋白轉印甲醇濃度低甚至不含甲醇的用于高分子量蛋白的轉印

3、PVDF膜處理取出PVDF膜,用甲醇浸泡數秒鐘,然后放入CAPS電印跡緩沖液中(注此后的操作須防止PVDF膜干涸如果膜變干,須重復本步驟的操作)

4、凝膠處理取出電泳凝膠,在CAPS緩沖液中浸泡5-10分鐘(注轉移某些強堿性蛋白pI>9.0時,可省略本步驟)

5、安裝轉印槽子將濾紙和海綿放入電印跡緩沖液中浸泡一下,然后按海綿、濾紙、PVDF膜、凝膠、濾紙、海綿的次序將電印跡夾層裝好,并放入小型電轉槽中

6、轉印條件50V恒壓條件下(100-170mA)于室溫下進行電印跡轉移,轉移時間為0.5-2小時(注務必排盡凝膠和PVDF膜之間的氣泡例如對70kD以上的蛋白質須延長轉移時間)

7、PVDF膜染色前處理取出PVDF膜并用去離子水略為漂洗,用甲醇浸泡數秒鐘,然后進行染色

8、膜染色考馬斯亮藍染色(將0.1%考馬斯亮藍R-250溶于40%甲醇/1%乙酸中)30-50秒(切勿超過1分鐘),50%甲醇脫色(勤換脫色液),用去離子水充分洗滌,然后晾干即可


CAPS緩沖液配制

1、10xCAPS(100mmol/L)緩沖液配制,方法如下CAPS,22.13g加去離子水到900ml2mol/L NaOH(約20ml)將pH值調到11.0,然后定容到1L,貯存于4C

2、CAPS電印跡緩沖液(含10%甲醇的1*CAPS)配制,方法如下10xCAPS 200ml加入甲醇200ml加入去離子水1600ml即可


其他應用

CAPS還是制造焊接材料、空調設備和制造的原料還用于制造煙火用作分析試劑、熱交換載體,也用于制藥工業用于空氣調節、煙火、干電池也用作助焊劑、干燥劑針對涂料行業,用于水性異氫酸酯固化劑。湖南韻邦研發生產各種生物緩沖劑,包括CAPS、TRIS、BICINE、MOPS等,純度高>99%,工藝穩定,歡迎各位詳詢

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談談CAPS在蛋白質轉膜實驗中的應用

作者:湖南韻邦生物醫藥有限公司 瀏覽: 發表時間:2021-10-28 10:51:21


CAPS是,全稱3-(環己胺)-1-丙磺酸,一種有機化學物質,白色結晶粉末,CAS號1135-40-6,是一種生物緩沖劑,常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒。用于酶化學及HPLC分離堿性藥物的緩沖液,在蛋白測序的轉膜過程中應用廣泛。CAPS緩沖液由CAPS、去離子水組成,調PH到11.0,用于纖連蛋白的純化。


操作要點

1、SDS-PAGE電泳按常規條件進行(CAPS系統用于>=20KD蛋白Tris-Tricine系統用于低分子量蛋白,也可用于高分子量蛋白)

2、甲醇濃度CAPS電印跡緩沖液中甲醇濃度范圍是0-20%(甲醇濃度高,用于低分子量蛋白轉印甲醇濃度低甚至不含甲醇的用于高分子量蛋白的轉印

3、PVDF膜處理取出PVDF膜,用甲醇浸泡數秒鐘,然后放入CAPS電印跡緩沖液中(注此后的操作須防止PVDF膜干涸如果膜變干,須重復本步驟的操作)

4、凝膠處理取出電泳凝膠,在CAPS緩沖液中浸泡5-10分鐘(注轉移某些強堿性蛋白pI>9.0時,可省略本步驟)

5、安裝轉印槽子將濾紙和海綿放入電印跡緩沖液中浸泡一下,然后按海綿、濾紙、PVDF膜、凝膠、濾紙、海綿的次序將電印跡夾層裝好,并放入小型電轉槽中

6、轉印條件50V恒壓條件下(100-170mA)于室溫下進行電印跡轉移,轉移時間為0.5-2小時(注務必排盡凝膠和PVDF膜之間的氣泡例如對70kD以上的蛋白質須延長轉移時間)

7、PVDF膜染色前處理取出PVDF膜并用去離子水略為漂洗,用甲醇浸泡數秒鐘,然后進行染色

8、膜染色考馬斯亮藍染色(將0.1%考馬斯亮藍R-250溶于40%甲醇/1%乙酸中)30-50秒(切勿超過1分鐘),50%甲醇脫色(勤換脫色液),用去離子水充分洗滌,然后晾干即可


CAPS緩沖液配制

1、10xCAPS(100mmol/L)緩沖液配制,方法如下CAPS,22.13g加去離子水到900ml2mol/L NaOH(約20ml)將pH值調到11.0,然后定容到1L,貯存于4C

2、CAPS電印跡緩沖液(含10%甲醇的1*CAPS)配制,方法如下10xCAPS 200ml加入甲醇200ml加入去離子水1600ml即可


其他應用

CAPS還是制造焊接材料、空調設備和制造的原料還用于制造煙火用作分析試劑、熱交換載體,也用于制藥工業用于空氣調節、煙火、干電池也用作助焊劑、干燥劑針對涂料行業,用于水性異氫酸酯固化劑。湖南韻邦研發生產各種生物緩沖劑,包括CAPS、TRIS、BICINE、MOPS等,純度高>99%,工藝穩定,歡迎各位詳詢

談談CAPS在蛋白質轉膜實驗中的應用

作者:湖南韻邦生物醫藥有限公司 瀏覽: 發表時間:2021-10-28 10:51:21


CAPS是,全稱3-(環己胺)-1-丙磺酸,一種有機化學物質,白色結晶粉末,CAS號1135-40-6,是一種生物緩沖劑,常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒。用于酶化學及HPLC分離堿性藥物的緩沖液,在蛋白測序的轉膜過程中應用廣泛。CAPS緩沖液由CAPS、去離子水組成,調PH到11.0,用于纖連蛋白的純化。


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1、SDS-PAGE電泳按常規條件進行(CAPS系統用于>=20KD蛋白Tris-Tricine系統用于低分子量蛋白,也可用于高分子量蛋白)

2、甲醇濃度CAPS電印跡緩沖液中甲醇濃度范圍是0-20%(甲醇濃度高,用于低分子量蛋白轉印甲醇濃度低甚至不含甲醇的用于高分子量蛋白的轉印

3、PVDF膜處理取出PVDF膜,用甲醇浸泡數秒鐘,然后放入CAPS電印跡緩沖液中(注此后的操作須防止PVDF膜干涸如果膜變干,須重復本步驟的操作)

4、凝膠處理取出電泳凝膠,在CAPS緩沖液中浸泡5-10分鐘(注轉移某些強堿性蛋白pI>9.0時,可省略本步驟)

5、安裝轉印槽子將濾紙和海綿放入電印跡緩沖液中浸泡一下,然后按海綿、濾紙、PVDF膜、凝膠、濾紙、海綿的次序將電印跡夾層裝好,并放入小型電轉槽中

6、轉印條件50V恒壓條件下(100-170mA)于室溫下進行電印跡轉移,轉移時間為0.5-2小時(注務必排盡凝膠和PVDF膜之間的氣泡例如對70kD以上的蛋白質須延長轉移時間)

7、PVDF膜染色前處理取出PVDF膜并用去離子水略為漂洗,用甲醇浸泡數秒鐘,然后進行染色

8、膜染色考馬斯亮藍染色(將0.1%考馬斯亮藍R-250溶于40%甲醇/1%乙酸中)30-50秒(切勿超過1分鐘),50%甲醇脫色(勤換脫色液),用去離子水充分洗滌,然后晾干即可


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1、10xCAPS(100mmol/L)緩沖液配制,方法如下CAPS,22.13g加去離子水到900ml2mol/L NaOH(約20ml)將pH值調到11.0,然后定容到1L,貯存于4C

2、CAPS電印跡緩沖液(含10%甲醇的1*CAPS)配制,方法如下10xCAPS 200ml加入甲醇200ml加入去離子水1600ml即可


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操作要點

1、SDS-PAGE電泳按常規條件進行(CAPS系統用于>=20KD蛋白Tris-Tricine系統用于低分子量蛋白,也可用于高分子量蛋白)

2、甲醇濃度CAPS電印跡緩沖液中甲醇濃度范圍是0-20%(甲醇濃度高,用于低分子量蛋白轉印甲醇濃度低甚至不含甲醇的用于高分子量蛋白的轉印

3、PVDF膜處理取出PVDF膜,用甲醇浸泡數秒鐘,然后放入CAPS電印跡緩沖液中(注此后的操作須防止PVDF膜干涸如果膜變干,須重復本步驟的操作)

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6、轉印條件50V恒壓條件下(100-170mA)于室溫下進行電印跡轉移,轉移時間為0.5-2小時(注務必排盡凝膠和PVDF膜之間的氣泡例如對70kD以上的蛋白質須延長轉移時間)

7、PVDF膜染色前處理取出PVDF膜并用去離子水略為漂洗,用甲醇浸泡數秒鐘,然后進行染色

8、膜染色考馬斯亮藍染色(將0.1%考馬斯亮藍R-250溶于40%甲醇/1%乙酸中)30-50秒(切勿超過1分鐘),50%甲醇脫色(勤換脫色液),用去離子水充分洗滌,然后晾干即可


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1、10xCAPS(100mmol/L)緩沖液配制,方法如下CAPS,22.13g加去離子水到900ml2mol/L NaOH(約20ml)將pH值調到11.0,然后定容到1L,貯存于4C

2、CAPS電印跡緩沖液(含10%甲醇的1*CAPS)配制,方法如下10xCAPS 200ml加入甲醇200ml加入去離子水1600ml即可


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CAPS是,全稱3-(環己胺)-1-丙磺酸,一種有機化學物質,白色結晶粉末,CAS號1135-40-6,是一種生物緩沖劑,常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒。用于酶化學及HPLC分離堿性藥物的緩沖液,在蛋白測序的轉膜過程中應用廣泛。CAPS緩沖液由CAPS、去離子水組成,調PH到11.0,用于纖連蛋白的純化。


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2、甲醇濃度CAPS電印跡緩沖液中甲醇濃度范圍是0-20%(甲醇濃度高,用于低分子量蛋白轉印甲醇濃度低甚至不含甲醇的用于高分子量蛋白的轉印

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7、PVDF膜染色前處理取出PVDF膜并用去離子水略為漂洗,用甲醇浸泡數秒鐘,然后進行染色

8、膜染色考馬斯亮藍染色(將0.1%考馬斯亮藍R-250溶于40%甲醇/1%乙酸中)30-50秒(切勿超過1分鐘),50%甲醇脫色(勤換脫色液),用去離子水充分洗滌,然后晾干即可


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1、10xCAPS(100mmol/L)緩沖液配制,方法如下CAPS,22.13g加去離子水到900ml2mol/L NaOH(約20ml)將pH值調到11.0,然后定容到1L,貯存于4C

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